Паратуберкулез крупного рогатого скота: диагностика и лечение

Обновлено: 18.09.2024

Изучены семь диагностических препаратов для аллергической диагностики паратуберкулеза крупного рогатого скота в неблагополучных хозяйствах. Установлено, что для диагностики заболевания наиболее специфичным является ППД-туберкулин для птиц в дозе 2500 ТE, реагирующими считаются животные с увеличением кожной складки на 6 мм и выше, независимо от характера реакции.

В ветеринарной практике нашей страны для аллергической диагностики паратуберкулеза крупного рогатого скота применяли внутрикожную пробу с альт-туберкулином для птиц, предложенную П.П. Вишневским еще в 1939 году. Препарат вводили молодняку до двух лет в дозе 0,2 мл, животным от двух до трех лет - в дозе 0,3 мл, старше трех лет - в дозе 0,4 мл. Им же разрабатывался и препарат из возбудителя паратуберкулеза - паратуберкулин, который не был внедрен в практику.

Основанием для применения птичьего туберкулина для диагностики паратуберкулеза крупного рогатого скота является близкое родство между микобактериями туберкулеза птичьего вида и микобактериями паратуберкулеза. Установлена не только аллергенная общность, но и общность протеинов, входящих в их химическую структуру. Вишневский считал, что аллерген, приготовленный из возбудителя паратуберкулеза, является более надежным диагностическим средством, чем альт-туберкулин для птиц, но он беден действующим веществом.

В зарубежных странах для аллергической диагностики паратуберкулеза животных применяют ППД-туберкулин для птиц, или ионин (паратуберкулин).

Предлагаемые в нашей стране паратуберкулины (В.В. Корнеев, М.П. Новикова, Э.Д. Лакман) не были приняты в практику после комиссионных испытаний.

Широкие производственные испытания диагностической ценности альт-туберкулина для птиц в 28 неблагополучных хозяйствах показали несовершенство диагностики болезни этим препаратом (В.Е. Щуревский, Н.П. Овдиенко, А.П. Аликаева, 1979). Именно поэтому нами была поставлена задача изыскать более совершенный аллерген для диагностики паратуберкулеза крупного рогатого скота.

Для аллергической диагностики паратуберкулеза у КРС были изучены ППД- и альт-туберкулины для птиц в разных объемах и концентрациях, ППД- туберкулин для птиц производства Франции, Чехии, паратуберкулины (ионины), приготовленные по методике Е.С. Орлова, а также паратуберкулин (ионин), приготовленный из обработанных ультразвуком микобактерий паратуберкулеза и паратуберкулин, приготовленный по методике ВИЭВ. Кроме этого, протеиновые фракции, выделенные по методике ВИЭВ из возбудителя туберкулеза птичьего вида.

Указанные препараты проверены на стерильность, безвредность, отсутствие сенсибилизирующих свойств. Испытания проводились на телятах, сенсибилизированных различными видами убитых микобактерий, крупном рогатом скоте в благополучных по туберкулезу и паратуберкулезу хозяйствах (на специфичность), на КРС, инфицированном возбудителем туберкулеза птиц, на крупном рогатом скоте, сенсибилизированном атипичными микобактериями (на видовую специфичность), на крупном рогатом скоте, зараженном туберкулезом бычьего вида, и, наконец, на КРС в неблагополучных по паратуберкулезу стадах.

В благополучных по паратуберкулезу и туберкулезу хозяйствах исследовали 402 коровы и установили, что на введение ППД-туберкулина для птиц в дозе 10000 ТE реагирует до 5% исследованных животных. Особенно много реагирующих особей (до 11%) выявляется на повторное введение ППД-туберкулина для птиц в дозе 10000 ТE.

На первое введение ППД-туберкулина для птиц в дозе 5000 ТE реагировало до 2% исследованных животных (с незначительным увеличением толщины кожной складки - на 3 мм). На повторное введение ППД для птиц в дозе 5000 ТE реагировало до 6% исследованных особей.

На ППД для птиц в дозе 2500 ТE выявили до 2% животных с незначительным увеличением толщины кожной складки (на 3 мм) как на первое, так и на повторное введение туберкулина.

Из результатов исследования видно, что с повышением дозы ППД-туберкулина для птиц увеличивается число реагирующих животных на введение туберкулина. Особенно много реагирующих особей выявляется на повторное введение туберкулина.

На альт-туберкулин для птиц также выявляются реагирующие животные, но в меньшем количестве. На повторное введение АТК для птиц количество реагирующих также возрастает.

В целом, в благополучных хозяйствах на ППД для птиц в дозах 10000 и 5000 ТE выявляется несколько больше реагирующих животных, чем на АТК для птиц.

В результате исследований на 34 телятах, экспериментально сенсибилизированных разными видами микобактерий, установили, что все сенсибилизированные животные реагировали на внутрикожное введение ППД- и альт-туберкулина для птиц.

Однако у сенсибилизированных микобактериями птичьего вида или M. intracellulare аллергические реакции на оба туберкулина проявлялись более интенсивно (13,3 - 15,3 мм), чем у животных, сенсибилизированных другими видами микобактерий. Так, особи, сенсибилизированные микобактериями туберкулеза бычьего вида или паратуберкулеза, реагировали несколько слабее (10,6 - 11,0 мм). Наиболее слабо реагировали животные, сенсибилизированные M. fortuitum (5,3 мм).

Интенсивность аллергических реакций на альт-туберкулин в дозе 0,2 мл и ППД в дозе 10000 ТE в 0,2 мл была примерно одинаковой. На дозы ППД 5000 и 2500 ТE интенсивность проявления аллергических реакций была несколько меньше, чем на АТК.

С целью выяснения специфичности аллергенов в разных дозах, оптимальных критериев оценки аллергических реакций в неблагополучных по паратуберкулезу хозяйствах провели убой исследованных животных. При патологоанатомическом и гистологическом исследованиях 37 животных диагноз на паратубе-кулез подтвердили у 10 (27,0%) убитых особей. Те, у которых обнаружены паратуберкулезные изменения, реагировали на первое введение ППД-туберкулина для птиц.

1. При диагностике паратуберкулеза крупного рогатого скота ППД-туберкулин для птиц при однократном введении в дозах 5000 и 2500 ТE в 0,2 мл растворителя специфичен и более активен, чем альт-туберкулин для птиц в принятой диагностической дозе 0,2 - 0,4 мл при двукратном введении.

2. При применении всех видов различных аллергенов из-за близкого антигенного родства выявляются реагирующие животные, сенсибилизированные атипичными микобактериями.

3. Внутрикожное введение АТК для птиц в дозе 0,4 мл исключает возможность применения безыгольных инъекторов из-за конструктивных особенностей инъекторов, имеющихся в распоряжении ветспециалистов.

4. Для диагностики паратуберкулеза крупного рогатого скота целесообразно однократное применение ППД-туберкулина для птиц в дозе 2500 ТE в объеме 0,2 мл растворителя.

5. Учет аллергических реакций следует проводить через 72 часа после введения туберкулина.

6. Реагирующими следует считать животных с увеличением толщины кожной складки на 6 мм и выше, независимо от характера аллергической реакции.

Паратуберкулёз крупного рогатого скота считается самым коварным и опасным заболеванием. Причем эта болезнь чревата не только материальными убытками. Для такого недуга характерно диффузное утолщение слизистых и подслизистых тканей кишечной системы, что со временем приводит к истощению и гибели животного. Образуются поперечные и продольные складки, из-за чего происходит нарушение всасывающих функций. Интересно, что данная патология способна поразить и других домашних травоядных парнокопытных. Но главной проблемой является вероятность инфицирования паратуберкулёзом людей.

Как лечить животных, инфицированных паратуберкулезом

Лечить животное, у которого выявлена болезнь Йоне, бессмысленно, так как это неизлечимое заболевание. Все вольные особи с подтверждённым паратуберкулёзом подлежат изоляции с последующим убоем. Мясную продукцию можно использовать для приготовления еды. А вот от органов и тканей, пораженных инфекцией, придется избавиться.

Профилактические мероприятия

Поскольку здоровые животные могут быть инфицированы болезнью Йоне от зараженных питомцев, необходимо принять соответствующие меры, чтобы предупредить контакт и повысить защитные силы в организме коров к бактерии, провоцирующей развитие заболевания. С этой целью необходимо:

Соблюдение зоогигиены: все разновидности животных, склонных патологии, должны содержаться по отдельности. Фермы должны находиться на расстоянии минимум 100 метров друг от друга. Причем крупный и мелкий рогатый скот нужно выпасать отдельно.
Периодически проводить обследование на присутствие паратуберкулезной бактерии. Коровы, у которых выявлена позитивная реакция на проведение РСК пробы, подлежат убою. Также на убой следует отправлять малышей возрастом от 10 месяцев до 1,5 лет, если реакция на введение туберкулина дважды была положительной.
Регулярно дезинфицировать коровник путем нанесения побелки на стены, обрабатывать инвентарь и оборудование с помощью дезинфицирующих растворов. Снятие карантина с фермы осуществляется при получении негативных результатов после введения птичьего туберкулина или серологического исследования на протяжении года.

Что касается профилактики заражения паратуберкулёзом для людей, нужно употреблять в пищу только пастеризованное молоко. А субъектам, работающим на ферме с животными, необходимо следить, чтобы одежда всегда была чистой и своевременно подвергать её дезинфекции.

Паратуберкулез (паратуберкулезный энтерит, болезнь Йоне) - хроническое инфекционное заболевание жвачных животных, вызванное возбудителем Mycobacterium paratuberculosis. Болезнь характеризуется истощением и гибелью животных, в результате диффузного утолщения слизистой и подслизистой оболочек кишечника. Происходит образование поперечных и продольных складок, нарушая всасывающие функции.

Источники и пути инфицирования

Источником заражения является инфицированная особь. Фермерам, которые занимаются разведением сельскохозяйственных животных, надо быть в особенности внимательными, поскольку болезнетворный организм способен с легкостью передаваться между разными видами парнокопытных. Также источником инфекции может стать навоз зараженного питомца. Паратуберкулёзный энтерит крупного рогатого скота характеризуется медленным развитием, так что особь, которая по внешнему виду полностью здорова, в действительности может быть зараженной.

Зачастую животное инфицируется уже на протяжении первого года жизни. В организм телёнка патогены проникают с материнским молоком либо частичками фекалий (в случае содержания животных в ненадлежащих условиях). Дело в том, что засохшие каловые массы в области бёдер буренки являются рассадником болезнетворных микроорганизмов. Поэтому коровник следует содержать в чистоте. Кроме того, есть вероятность внутриутробного инфицирования.

В большей степени коровы и другие парнокопытные подвержены паратуберкулёзному энтериту на протяжении первого года жизни. Хотя симптоматика, свойственная заболеванию, проявляется только через 2 года, а иногда и больше после инфицирования. Когда заражение болезнью Йоне произошло в более старшем возрасте, симптомы недуга также проявятся спустя 2 года после поражения организма бактерией. Это же касается и телят, которые получили в незначительном количестве болезнетворную бактерию.

Возникновению паратуберкулёза крупного рогатого скота способствует воздействие некоторых негативных факторов:

ослабленная иммунная система при неполноценном рационе питания;
заражение гельминтами;
переохлаждения;
перегрев.

Любой из перечисленных факторов говорит о ненадлежащей заботе о животных.

Признаки кахексии

По внешним признакам кахексия похожа на дегидратацию, однако это состояние не сопровождается потерей воды из мягких тканей. В этом случае у животного снижается масса тела, атрофируются мышцы, отмечается появление слабости. При щипковой пробе не наблюдается признаков обезвоживания. Хотя чаще всего на фоне паратуберкулёзного энтерита отмечается совместное течение кахексии с дегидратацией.

Симптоматика паратуберкулезного энтерита

Основными признаками инфицирования паратуберкулёзом крупного рогатого скота являются понос и истощение. Стоит заметить, что зачастую симптоматика проявляется примерно в 2-6-летнем возрасте, несмотря на то что заражение происходит ещё в течение первого года жизни, а иногда в период внутриутробного развития.

На раннем этапе развития паратуберкулёзного энтерита симптоматика слабовыраженная. Чаще всего клиническая картина заболевания проявляется снижением массы тела, понижением производительности и незначительной взъерошенностью шерстяного покрова. Выделение каловых масс наблюдается немного чаще чем обычно, но фекалии достаточно густые, эпителиальные остатки, кровь и слизь отсутствуют. Систематически пищеварительные функции стабилизируются.

Спустя некоторое время после возникновения поноса у коров отмечается отёчность мягких тканей в области нижней челюсти. Такой признак называют «бутылочной челюстью» либо «межчелюстным отёком». Объясняется это выведением белков из кровотока на фоне расстройства пищеварительных функций.

Дальнейшее прогрессирование болезни приводит к ещё большему снижению веса у животного. Также наблюдается обезвоживание в сочетании с тяжёлой кахексией, из-за чего корова гибнет.

Важно! Животное, инфицированное паратуберкулёзным энтеритом, не страдает от снижения аппетита.

Симптомы течения паратуберкулеза

Период заражения (инкубации) от 1 месяца до нескольких лет. Специалисты выделяют латентную (скрытую) и открытую (клиническую) формы течения заболевания. Скрытая форма паратуберкулеза отличается отсутствием признаков болезни. Возможен переход данной формы течения болезни в клиническую форму. Чаще всего это происходит после отела (окота) животного. У животного наблюдается общая слабость, снижение удоя, потеря веса, температура тела стабильная, начинается понос. Кал жидкий, с обильной слизью, пузырьками газа и кровью. Болезнь истощает животное, оно не в состоянии стоять, наблюдается шилозадость. Болезнь может длиться несколько месяцев.

Этиология

Возбудителем заболевания паратуберкулеза является Mycobacterium paratuberculosis. Тонкая, полиморфная, грамположительная, неподвижная палочка, длина которой 0,5-1,5 мкм, ширина - 0,2-0,5 мкм. Она устойчива к кислотно-спиртовой среде, химическим дезинфицирующим средствам и различным проявлениям внешней среды. Способна сохранять патогенность в земле и навозе практически 1 год.

Паратуберкулез поражает крупный рогатый скот, овец, коз, оленей, диких жвачных животных, верблюдов, кроликов. Бактерионосителями могут оказаться свиньи и лошади.

Основными носителями возбудителя заболевания являются животные с открытой и скрытой формой течения паратуберкулеза. С калом, больные животные выделяют огромное количество микобактерий, происходит инфицирование пастбищ, водопоев, кормов, подстилок, помещений и прочих объектов, являющихся факторами передачи этого заболевания.

Прежде всего, паратуберкулез опасен для молодняка до шести месяцев, заражение которого происходит через корм, питье, соски вымени, известна и межвидовая передача.

Паратуберкулёз - что это?

Ещё это заболевание называют болезнью Йоне или паратуберкулёзным энтеритом. Его причислят к патологиям бактериальной природы хронического течения. Для паратуберкулёза характерно систематическое проявление диареи, развитие продуктивного энтерита, постепенное истощение, что в дальнейшем приводит к гибели животного. Формирование болезни происходит при воздействии на организм бактерии Mycobacterium avium из подгруппы paratuberculosis.

Заболевание может поразить таких одомашненных травоядных парнокопытных животных:

крупный рогатый скот;
овец;
буйволов;
верблюдов;
коз;
оленей;
яков.

Животные в списке представлены по снижению уровня предрасположенности паратуберкулёзу.

Лечение

Лечение паратуберкулеза на сегодняшний день не найдено.

Диагностические мероприятия

С целью правильного определения заболевания, которым поражено животное, ветеринар для начала должен провести дифференциальную диагностику для исключения кокцидиоза, туберкулёза, заражения гельминтами и диетической диареи. Диетическая диарея характеризуется массовостью. Для подтверждения поражения гельминтами и кокцидиоза проводится копрологическое исследование. При кокцидиозе в каловых массах определяется кровяная примесь, а диарея краткосрочная. На фоне туберкулёза развитие энтерита наблюдается довольно редко, сопровождается поражением лимфатических узлов и кахексией.

Важно! Диагностика заболевания подразумевает проведение серологического и аллергического исследования.

Серологическое исследование предполагает изготовление из крови животных, находящихся под подозрением, сыворотки с последующим проведением анализа посредством РСК. Такая методика позволяет выявить зараженную особь в 85% случаев.

Аллергическое обследование проводится двумя способами: с помощью альтуберкулина для птиц или паратуберкулина. Первая методика дает позитивный ответ в 80% случаев, а вторая - в 94%.

Проводится аллергическое исследование путем внутрикожной пробы. Проверка реакции осуществляется через двое суток после первичного введения. Если реакция будет позитивной, в зоне укола появится отёчность без определенных границ и формы, размерами до 4*11 см и больше. Также наблюдается повышение местной температуры в области отека. Припухлость по краю тестоватая, а в центре жёсткая. Область укола болезненная.

Когда результат получился сомнительным, проба проводится вторично. Реакция проверяется через 24 часа после введения препарата.

Болезнь Йоне считают установленной:

Если в предоставленном материале обнаружены кислотоустойчивые палочки с характерной паратуберкулезным патогенам локализацией.
Если в препаратах, для изготовления которых использовали лимфоузлы и части кишечной системы, присутствуют свойственные паратуберкулёзному энтериту гистологические перемены в виде интенсивной пролиферации эпителиоидной, гигантской и плазматической клеточной ткани.

Лабораторная диагностика по времени занимает около 3 дней.

Признаки обезвоживания

Дегидратацией (или обезвоживанием) называют процесс потери в мягких тканях воды на фоне нарушенного обмена веществ. При инфицировании паратуберкулёзным энтеритом организм обезвоживается из-за диареи. Когда мягкие ткани теряют больше четверти водяных ресурсов корова гибнет.

На фоне дегидратации наблюдается возникновение таких признаков:

постоянная жажда;
угнетенное состояние;
снижение объёма урины;
судороги;
после щипковой пробы складка на коже длительное время не выпрямляется;
шерстяные покровы сухие, взъерошенные;
ткани носогубного зеркальца сухие.

Обезвоживание у животного, зараженного болезнью Йоне, проявляется уже на последнем этапе заболевания.

Диагностика

Латентная форма течения болезни у животных не диагностируется. Используются бактериоскопические, аллергические (когда в организм вводят птичий туберкулин или паратуберкулин и исследуют результат аллергической пробы) и серологические методы прижизненной диагностики паратуберкулеза.

Профилактика

Для комплектования стада и при завозе поголовья скота необходимо выбирать благополучные по паратуберкулезу хозяйства, так как носителями заболевания являются латентно больные животные. Кормление и содержание поголовья должно соответствовать зоогигиеническим требованиям. Для своевременного выявления очагов паратуберкулеза, рекомендовано тщательно осматривать кишечник после убоя животного и поступления на мясокомбинат.

При диагностике паратуберкулеза на хозяйство накладываются ограничения. Клинически больные животные должны своевременно сдаваться на убой. Для выявления скрытой формы заболевания животных рекомендовано проводить аллергические пробы и серологический метод диагностики. Молоко молодняку давать только после кипячения и пастеризации. Навоз сжигать или подвергать биотермическому обеззараживанию в течение двух лет. Если в хозяйстве подтверждено заболевание животных паратуберкулезом, необходимо провести дезинфекцию сельхозпомещений. Карантин снимают с хозяйства, если получены отрицательные результаты исследования птичьим туберкулином или серологическим методом диагностики паратуберкулеза в течение 1 года.

По материалам пресс-службы ФГБУ "Краснодарская межобластная ветеринарная лаборатория" Россельхознадзора
12 мая 2014 г.

Паратуберкулез (paratuberculosis) (паратуберкулезный энтерит, болезнь Йоне) - инфекционное хроническое заболевание, приводящее к истощению и гибели животных, характеризующееся диффузным утолщением слизистой и подслизистой оболочек кишечника с образованием поперечных и продольных складок сопровождающееся нарушением всасывающей функции.

Паратуберкулез причиняет значительный экономический ущерб, который складывается из браковки племенных животных, падежа, недополучения приплода, затрат кормов на выращивание и т.д.

Этиология. Возбудитель — Mycobacterium paratuberculosis. Представляет собой тонкую, полиморфную, грамположительную, неподвижную палочку длиной 0,5-1,5 мкм и шириной 0,2-0,5 мкм, спор не образует, растет в аэробных условиях, кислото-спиртоустойчивая, хорошо окрашивается по Циль-Нильсену в рубиново-красный цвет.

Возбудитель паратуберкулеза на обычных питательных средах не растет, для выращивания применяют среду Дюбо-Смита. Mycobacterium paratuberculosis очень устойчив во внешней среде, так в земле и навозе сохраняет патогенность более 11 месяцев, является высокоустойчивым к действию химических дезинфицирующих средств.

Эпизоотологические данные. К возбудителю восприимчивы крупный рогатый скот, овцы, козы, дикие жвачные, олени, из лабораторных животных восприимчивы кролики, хомяки и белые мыши при внутривенном заражении. Лошади и свиньи могут быть бактерионосителями.

Основным источником возбудителя паратуберкулеза являются клинически и латентно больные животные, которые выделяют с фекалиями огромное количество микобактерий, обильно инфицируя водопои, пастбища, корма, подстилку, помещения и др. объекты внешней среды, которые являются факторами передачи инфекции.

Заражаются в основном молодняк в возрасте до 6 месяцев через инфицированные корма и воду, а также через загрязненные микобактериями соски вымени, при выпаивании контаминированного молока, возможна также межвидовая передача.

Течение и симптомы. Инкубационный период длится месяцами и даже годами. Различают латентное (скрытая форма) и открытое (клиническая форма) течение болезни.

При скрытой форме признаки заболевания отсутствуют.

Скрытая форма заболевания может переходить в клиническую, особенно часто после отела (окота). Животные преимущественно лежат, снижают удой, теряют в весе, температура все время остается в норме, появляется понос. Испражнения жидкие и содержат много слизи, пузырьков газа, крови. К концу болезни животные резко истощены, наблюдается шилозадость, не могут стоять. Заболевание длиться несколько месяцев.

Патогенез. Попав в кишечник, микобактерии паратуберкулеза попадают в центральное лимфатическое пространство ворсинок, где захватываются макрофагами и начинают в них размножаться. Первичный аффект обнаруживается в апикальной части ворсинок в виде скоплений эпителиоидных клеток или мелких эпителиоидных гранулем. В дальнейшем вследствие пролиферации эпителиоидные клетки замещают всю ткань слизистой оболочки. В них микобактерии паратуберкулеза размножаются в большом количестве и вместе со слущивающимся эпителием выделяются с фекалиями во внешнюю среду.

Патологоанатомические изменения. Наиболее яркие изменения обнаруживают в кишечнике и мезентериальных лимфатических узлах; чаще поражаются тощая и особенно подвздошная кишки. Слизистая оболочка собрана в толстые, плотные, извилистые складки, похожие на извилины мозга. Складки при поглаживании не расправляются, окрашены в серо-белый или желтоватый цвет, бархатисты, с очаговыми и точечными кровоизлияниями, покрыты обильным количеством мутной слизи.

Диагноз. Эффективного диагностического средства для выявления латентно больных животных пока нет. Для прижизненной диагностики используют бактериоскопический, аллергический (вводят птичий туберкулин или паратуберкулин и, как при туберкулинизации учитывают результат аллергической пробы) и серологический (РСК) методы.

Дифференциальный диагноз. Необходимо исключить диетические поносы, кокцидиоз, глистные инвазии и туберкулез. Диетические поносы в отличие от паратуберкулеза носят массовый характер. Кокцидиоз и глистные инвазии исключаются данными копрологического исследования; к тому же при кокцидиозе понос бывает кратковременным и в кале содержится обильное количество крови. Энтерит на почве заболевания туберкулезом встречается редко, сопровождается кахексией, поражением лимфатических узлов.

Лечение при паратуберкулезе не разработано.

Профилактика и меры борьбы. Поскольку паратуберкулез в хозяйства заносится с латентно больными животными, необходимо особое внимание обращать на то, чтобы комплектование стад и завоз поголовья осуществлялся только из благополучных по паратуберкулезу хозяйств. Для предупреждения болезни необходимо соблюдать зоогигиенические требования по содержанию и кормлению животных. Необходимо проводить тщательный осмотр кишечника после убоя животных, поступивших на мясокомбинат, с целью своевременного выявления скрытых очагов болезни.

Если в хозяйстве диагностирован паратуберкулез на хозяйство накладывают ограничения. Необходимо своевременно выделять всех клинически больных животных и сдавать их на убой.

Проводить с обязательной перепроверкой аллергическую пробу и РСК для выявления латентно больных животных. Молоко пастеризуют или кипятят, после чего его спаивают молодняку. Навоз сжигают или подвергают биотермическому обеззараживанию в течение 2-х лет. В неблагополучном хозяйстве проводят тщательную дезинфекцию помещений. Ограничения снимают с хозяйства при условии получения отрицательных результатов исследований птичьим туберкулином или отрицательных исследований в РСК в течение года.

Паратуберкулёз, паратуберкулёзный энтерит, болезнь Йоне (Johnes disease - англ.; Paratuberculöse der Rinder, Johnesche Krankheit - нем.; Paratuberculeuse - франц.) - хроническая инфекционная болезнь, в основном, жвачных животных, чаще всего протекающая латентно, характеризующееся поражением кишечника, мезентериальных лимфатических узлов и, как следствие, - сопровождающаяся расстройством желудочно-кишечного тракта (диареей) с прогрессирующим истощением и потерей продуктивности до летального исхода.

Клинические признаки паратуберкулёза - медленно прогрессирующее истощение и диарея. В начале диарея носит перемежающий, скачкообразный характер, затем становится постоянной. Диарея более характерна для крупного рогатого скота, чем для других видов жвачных животных.

При заражении паратуберкулёзом, в первую очередь, поражается тонкий отдел кишечника. Поражения в кишечнике приводят к пониженному всасыванию белка и являются причиной утечки белка, что в конечном итоге ведёт к истощению мышц.

Паратуберкулёз крупного рогатого скота впервые был описан A. Johne и L. Frothingham в 1895 г. как особая форма туберкулеза кишок, вызываемая ослабленным возбудителем бычьего или птичьего вида туберкулеза.

B. Bang (1906) в связи с тем, что не смог выделить возбудителя болезни, а заражение патматериалом от больной коровы морских свинок и кроликов не удалось, предложил считать эту болезнь отличительной от туберкулёза и назвал её «хронический псевдотуберкулёзный энтерит».

В 1902 г. Mc. Fadilan назвал эту болезнь в честь первого автора, открывшего это заболевание, болезнь Ионе.

В 1912 г. T.W. Twort, Y.Z. Ingram из подвздошной кишки больной коровы на искусственных питательных средах выделили возбудителя и назвали его Mycobacterium enteritidis chronicae bovis. В дальнейшем, после исследования возбудителя как отдельного вида рода микобактерий, возбудитель заболевания был квалифицирован как Mycobacterium paratuberculosis, а болезнь названа паратуберкулёзом. После исследований с применением молекулярно-генетических методов было доказано, что гены M. avium и M. paratuberculosis на 99% гомологичны. В связи с тем, что в последние годы накопилось достаточно данных об общности протеинов, входящих в химическую структуру возбудителя паратуберкулёза и M. avium, в Manual Determinative Bacteriology Bergey (1989) возбудителем паратуберкулёза считается Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP). Поэтому возбудитель паратуберкулёза впоследствии стали считать подвидом микобактерий птичьего вида -Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP) (M.F. Thorel et al., 1990).

По данным Y. Benedictus et al. (1987), экономический ущерб от убоя каждой клинически больной коровы, по причине недополучения молока на 19,5% и снижения в нем жира и белка на 20%, составляет 279 фунтов стерлингов, а убыток от убоя коров, не имеющих клинических признаков паратуберкулёза, производится из-за снижения надоя молока на 16% и уменьшения содержания в нем жира и белка на 17,5%. В случаях задержки убоя больных коров на год, размер убытков увеличивается еще на 5-6%.

Кроме того, следует учитывать, что при убое клинически больных паратуберкулёзом коров потери более значительны, чем при многих других инфекциях, когда полностью используется туша больного животного. От клинически больного паратуберкулёзом животного туша бракуется и идет на утилизацию из-за атрофии мышц.

В настоящее время паратуберкулёз остается одной из недостаточно изученных, сложно контролируемых и диагностируемых инфекций. Инкубационный период может длиться от 6 месяцев до 15 лет, а может быть и самоизлечение, т.е. клиника может не проявиться за весь период жизни животного. При этом инфицированные животные, не проявляя клинических признаков болезни, являются носителями микобактерий и периодически выделяют возбудитель во внешнюю среду, что создает условия для заражения восприимчивых здоровых животных и как следствие этого -для распространения паратуберкулёза в стаде.

Поэтому, некоторые авторы сравнивают проблему паратуберкулёза с верхушкой айсберга (айсберг-эффект), когда на один клинический случай приходятся десятки случаев инфицированных животных в латентной форме.

Кроме того, в последние десятилетия ведутся дискуссии об общей этиологии паратуберкулёза животных и хронических воспалительных заболеваний кишечника других видов и человека, особенно о роли возбудителя паратуберкулёза в болезни Крона (Crohn`s disease) у людей. Это заболевание проявляется поражением желудочно-кишечного тракта, диареей и рвотой (R.J. Chiodini, 1989; C. Cocito et al., 1994). Гистопатологический анализ этой болезни показывал наличие гранулём и изменений в лимфатических узлах, напоминающие изменения при паратуберкулёзе животных (P. Schmitz-Moormann, P.M. Pittner, 1984).

В настоящее время существует предположение, что возбудитель паратуберкулёза является этиологическим агентом болезни Крона - хронического воспаления кишечника у человека. Болезнь Крона имеет две клинические формы: первая, «агрессивная», с наличием фистул (с перфорацией кишечника); вторая - вялотекущая (без перфорации). Существует и две теории патогенеза болезни: инфекционная и аутоиммунная. Обоснованием для предположения, что возбудитель паратуберкулёза вызывает у человека болезнь Крона, послужило выделение МАР из кишечника больных людей. Однако до настоящего времени причинно-следственные связи между возбудителем паратуберкулёза и патологией у людей не доказаны (В.И. Литвинов и соавт., 2008).

Возбудителя паратуберкулеза обнаруживали в кишечнике у пациентов с хроническими воспалительными поражениями в Италии, США, Великобритании и Чехии. Было отмечено выделение возбудителя паратуберкулеза из грудного молока больных (S.A. Naser et al., 2004).

При исследовании методом ПЦР биоматериала от людей с болезнью Крона характерная последовательность для МАР-гена IS900 была обнаружена у 65% больных людей (J.D. Sanderson et al., 1992).

D. Mishina et al. (1996), I. R.Grant et al. (1996; 1998), M. Meylan et al. (1996), J.R. Stabel et al (1997), J. Keswani, J.F. Frank (1998), N. Sung, M.T. Collins (1998, 2000), J.R. Grant (2003); J.A. Donaghy et al. (2004); U. Spahr, R. Schafroht (2005), W.Y. Ayele et al. (2005), J. Ikonomohonlos et al. (2005), T. Tasar, R. Stephan (2005), K. Hruska et al. (2005) показали, что в сборном молоке после высокотемпературной обработки обнаруживают МАР, которые могут быть фактором передачи возбудителя от больных животных человеку. Авторы считают этот вид микобактерий потенциальным этиологическим агентом болезни Крона человека.

Однако другие авторы, E.A. Rubbery (2001), R.J. Greenstein (2003), считают, что очевидных доказательств взаимосвязи между возбудителем паратуберкулёза и болезнью Крона не имеется.

Европейская комиссия здравоохранения и научный комитет по охране здоровья животных в 2000 г. также рассматривали связь между этими заболеваниями, но так и не пришли к единому мнению. Однако и не исключили предположение, что возбудитель заболевания у животных и человека один.

В 2003 г. группа американских ветеринарных и медицинских специалистов представила в национальный научный совет США отчёт о двухгодичных исследованиях о возможной связи паратуберкулёза с болезнью Крона (L. Hutchinson, 2004). Однако дальнейшими классическими методами исследований связь между паратуберкулёзом животных и болезнью Крона у людей не была доказана. Проходивший в США в 2009 г. 10-й международный симпозиум по паратуберкулёзу также не дал конкретный ответ на этот вопрос. Тем не менее, в связи с широким распространением инфекции, а также в связи с возможной причастностью M. paratuberculosis к возникновению болезни Крона у человека, в некоторых странах (Австралии, Норвегии, Исландии, Японии, Нидерландах и США) созданы национальные программы по контролю, искоренению и профилактике паратуберкулёза (А.И. Завгородний и соавт., 2010).

В соответствии с «Наставлением по диагностике паратуберкулёза (паратуберкулёзного энтерита) животных», утвержденного Департаментом ветеринарии МСХ РФ 05.04.2001 г., диагноз на паратуберкулёз считается установленным:

- при наличии у животных характерных клинических признаков болезни и получении одновременно положительных результатов бактериоскопического или гистологического исследования биоматериала от этих животных;

- при обнаружении характерных патологоанатомических изменений в кишечнике и мезентериальных лимфатических узлах животных с гистологическим или бактериоскопическим подтверждением болезни, независимо от наличия или отсутствия клинических признаков болезни.

В неблагополучных по паратуберкулёзу крупного рогатого скота хозяйствах считают больными животных:

- при слабовыраженных клинических признаках болезни, независимо от результатов аллергического и серологического исследований;

- при отсутствии клинических признаков, но совпадающих положительных результатах аллергического и серологического исследований.

При установлении диагноза на паратуберкулёз хозяйство (отделение, ферму) объявляют неблагополучным и проводят оздоровительные мероприятия. Животных с клиническими признаками болезни сдают на убой. У остального поголовья животных в возрасте 18 мес. и старше два раза в год (весной и осенью) исследуют сыворотку крови в РСК с паратуберкулёзным антигеном. Животным, реагирующим в РСК, проводят внутрикожную аллергическую пробу с туберкулином (ППД) для птиц. Всех животных, при исследовании которых получены совпадающие положительные результаты туберкулинизации и РСК, сдают на убой.

Если в течение последних 12 мес. больные животные не выявляются, то систематические исследования (аллергические и серологические) прекращают, проводят регулярный клинический осмотр и учитывают результаты патологоанатомического вскрытия трупов павших животных и ветсанэкспертизы убойного скота.

Молодняк в возрасте от 6 до 18 мес. исследуют на паратуберкулёз внутрикожной пробой с туберкулином (ППД) для птиц. Реагирующих на туберкулин через 45-60 дней исследуют повторно, и животных с положительной реакцией сдают на убой.

Патматериал от всех убитых животных направляют в лабораторию для бактериоскопического и гистологического исследования на паратуберкулёз.

Хозяйство признают благополучным по паратуберкулёзу через три года после последнего случая выявления больного животного и проведения комплекса заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий.

Ретроспективный анализ эпизоотической ситуации показывает, что в СССР и РФ никогда не было широкого распространения паратуберкулёза крупного рогатого скота, как не было неблагополучных пунктов, где паратуберкулёз в «клинической форме» выявлялся у значительного числа животных.

Многолетний опыт работы сотрудников лаборатории микобактериозов ВИЭВ дает основание предполагать, что и в дальнейшем, при условии соблюдения положений утвержденных нормативных документов, паратуберкулёз крупного рогатого скота не получит широкого распространения. Тем более, что по технологии содержания высокопродуктивных животных, как правило, не содержат старых, больных и низкопродуктивных особей. Так, в хороших хозяйствах проводят ежемесячную выбраковку животных, а ежегодная выбраковка составляет до 30% поголовья крупного рогатого скота, т.е. за три-четыре года полностью обновляется все стадо.

Тем не менее, учитывая, что и на современном этапе борьбы с паратуберкулёзом нигде в мире нет достаточно эффективных средств диагностики (в соответствии с «Кодексом здоровья наземных животных» МЭБ от 2013 г. - при паратуберкулёзе нет рекомендуемых тестов, а в качестве альтернативных вариантов предлагается внутрикожная туберкулиновая проба и иммуноферментный анализ), необходимо совершенствование диагностики данного заболевания.

В «скрытости» инфекции, низкой чувствительности и специфичности прижизненных методов диагностики, сложности выделения, культивирования и идентификации возбудителя лабораторными методами и в отсутствии возможности воспроизведения паратуберкулёза на лабораторных животных - в этом заключаются основные причины сложности в установлении диагноза на паратуберкулёз.

При микроскопии микобактерии всех видов окрашиваются одинаково, поэтому микобактерии паратуберкулёза невозможно отличить от множества других видов (А.И. Алиев и соавт., 1990).

При выделении и необходимости идентификации вида возбудителя туберкулеза (бычий, человеческий или птичий) можно использовать биопробу на морских свинках, кроликах и курах. При паратуберкулёзе биопроба не применяется, т.к. возбудитель не патогенен для лабораторных животных.

Кроме того, в последние годы на диагностику паратуберкулёза влияет и так называемый «человеческий фактор». В настоящее время в нашей стране осталось очень мало ветеринарных специалистов, которые видели паратуберкулёз или работали с болезнью. Часто при патологоанатомическом осмотре убитых, подозреваемых в заболевании коров нормальную складчатость кишечника принимают за паратуберкулезные изменения. Следует иметь в виду, что поперечная или продольная складчатость слизистой оболочки кишечника наблюдается у здоровых животных вследствие предсмертных сокращений поперечных и продольных мышц кишечника, а так как в подвздошной кишке эти мышцы наиболее сильные, то складчатость в этом отрезке проявляется наиболее выражено. Кроме того, при паратуберкулёзе утолщается и становится складчатой не только слизистая, но и стенки кишечника. В конечном итоге они так утолщаются, что пораженный участок напоминает плотную резиновую трубку с узким просветом (И.В. Поддубский и соавт., 1962; В.Е. Щуревский, 1972; Н.П. Овдиенко и соавт., 2007; С.С. Нестреляев, 2013; А.Х. Найманов и соавт., 2014).

С учетом указанного, изучение возможности применения новых, более современных методов в целях совершенствования диагностики паратуберкулёза было и остается актуальной проблемой.

А.Х. Найманов, В.М. Калмыков (2012); В.М. Калмыков (2013) считают, что в связи с тем, что при паратуберкулёзе поражается желудочно-кишечный тракт, а возбудитель болезни в больших количествах выделяется во внешнюю среду вместе с фекальными массами, наиболее целесообразно использовать ПЦР для исследования фекалий у подозреваемых в заболевании животных.

На современном этапе борьбы с паратуберкулёзом крупного рогатого скота диагностика болезни должна быть комплексной с применением эпизоотологических, аллергических, серологических, молекулярно-генетических, патологоанатомических и бактериологических методов.

В комплекс необходимо включить и ПЦР для идентификации выделенных культур и исследования фекалий от подозреваемых в заражении животных.

В целях подтверждения диагноза на паратуберкулёз и в связи с отсутствием в арсенале метода биопробы на лабораторных животных, ПЦР должна занять достойное место в общем комплексе диагностических исследований на паратуберкулёз.

1. Алиев А.И., Фадеева Н.Г. Выделение микобактерий паратуберкулёза из патологического материала // Бюллетень ВИЭВ. 1990. №73-74. С. 71-76.

2. Завгородний А.И., Подмогова С.Д., Головко В.А. Паратуберкулёз сельскохозяйственных животных // Ветеринарная медицина. 2010. Выпуск 94. С. 171-173.

3. Калмыков В.М. Использование полимеразной цепной реакции в целях мониторинга благополучия по микобактериальным инфекциям зоопарковых, цирковых и сельскохозяйственных животных // Автореферат диссер. на соискание уч. ст. канд. вет. наук. 2013.

4. Кодекс здоровья наземных животных МЭБ. Двадцать второе издание. 2013. Том 1.

5. Литвинов В.И., Макарова М.В., Краснова М.А. Нетуберкулёзные микобактерии, МНПЦ борьбы с туберкулёзом / г. Москва. 2008. 254 с.

6. Найманов А.Х., Калмыков В.М. ПЦР при диагностике паратуберкулёза крупного рогатого скота // Российский ветеринарный журнал. 2012. № 3. С. 30-32.

7. Найманов А.Х., Толстенко Н.Г., Вангели Е.П., Букова Н.К., Калмыкова М.С. Паратуберкулёз крупного рогатого скота // Ветеринария. 2014. №1. С. 3-9.

8. Найманов А.Х., Толстенко Н.Г., Вангели Е.П., Устинова Г.И., Гулюкин М.И. Проблемы диагностики микобактериальных инфекций крупного рогатого скота // Ветеринария. 2014. №6. С. 3-9.

9. Найманов А.Х., Толстенко Н.Г., Вангели Е.П., Устинова Г.И., Сошникова Е.М., Кучерук О.Д. Проблемы диагностики паратуберкулёза крупного рогатого скота // Веткорм. 2014. №3. С. 10-12.

10. Найманов А.Х., Гулюкин М.И. Микобактериальные инфекции крупного рогатого скота (туберкулёз, паратуберкулёз) // Зооветкнига. Москва. 2014. 245 с.

11. Наставление по диагностике паратуберкулёза (паратуберкулезного энтерита) животных. Утв. Департаментом ветеринарии МСХ РФ 05.04.2001. № 13-5-02/0050.

12. Нестреляев С.С. Особенности патоморфологического метода диагностики при паратуберкулёзе животных // Труды ВИЭВ. 2013. Т. 77. С.125-133.

13. Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., Толстенко Н.Г., Якушева О.В., Устинова Г.И., Сидорчук В.А., Альбертян М.П., Суворов В.С. Профилактика и меры борьбы с паратуберкулёзом животных // Ветеринария. 2007. №12. С.3-7.

14. Поддубский И.В., Щуревский В.Е., Аликаева А.П. Материалы по изучению паратуберкулёза сельскохозяйственных животных // Труды ВИЭВ. 1962. Т. 26. С. 115-133.

16. Щуревский В.Е. Паратуберкуз сельскохозяйственных животных // Москва. - 1972. 127 с.

17. Alinovi C.A., Ward M.P., Lin Tsang Long, Moore G.E., Wu Ching Ching. Real-time PCR, compared to liquid and solid culture media and Elisa, for detection of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis // Veterinary Microbiology. 2009. 136 (1/2). P. 177-179.

18. Benedictus Y., Diykhuizen A.A., Stelwagen J. // Vet. Rec., 1987, 121, 7: 142-146.

19. Chamberlin W. Mycobacterium avium - Subsp. Paratuberculosis as one cause of Crohn's disease / Chamberlin W., Yaran D. Y., Hulten K. // Aliment Pharmacol Ther. 2001:15:337-346.

20. Cousins D., Whittington R., Masters A., Evans R., Kluver P. Investigation off alse positives in the is 900 PCR for identification of M. paratuberculosis // Mol. Cell. Probes. 1999. 14. 431-442.

21. Ellingson J.L.E., Bolin C.A., Stabel J.R. Identification of a gene unigue to Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis and application to diagnosis of paratuberculosis // Mol. Cell. Probes. 1998. 12. 133-142.

22. Hermon-Taylor J. The Causation of Crohn's Disease and Treatment Autimicrobial Drugs // Ital. J. Yastroenterology-Hepatology - 1998 Dec. - № 30(6). - P. 607-610.

Паратуберкулез (паратуберкулезный энтерит, болезнь Jonne) ― хроническая инфекционная болезнь животных, характеризующаяся поражением кишечника и мезентериальных лимфатических узлов, сопровождающаяся расстройством ЖКТ, прогрессирующим истощением до летального исхода.

Болезнь чаще регистрируют у жвачных животных. Из домашних жвачных, главным образом, у КРС молочного направления, овец, коз и верблюдов. Выделение возбудителя из организма зараженных особей происходит, в основном, с фекалиями, реже с мочой и молоком.

Возбудителя болезни впервые выделили Н.А. Johne и L. Frothingham в 1895 году из подвздошной кишки коровы, больной паратуберкулезом. В 1912 году T.W. Twort, G.Z Ingram изолировали возбудителя паратуберкулеза и назвали его Mycobacterium enteritidis chronicae bovis. В дальнейшем возбудитель болезни квалифицирован как Mycobacterium paratuberculosis, а затем как Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (МАР). МАР на 99 % генетически родственны с Mycobacterium avium, но отличаются микобактин-зависимостью, то есть, растут на питательных средах, содержащих фактор роста (микобактин). В последние годы возбудитель паратуберкулеза отнесен к комплексу Mycobacterium avium - intracellulare.

Паратуберкулез был и остается одной из сложно контролируемых и диагностируемых инфекций, так как инкубационный период длится от шести месяцев до 15 лет. При этом носители микобактерий могут не иметь клинических признаков болезни, но, периодически выделяя возбудителя во внешнюю среду, заражать восприимчивых животных. Некоторые авторы проблему паратуберкулеза сравнивают с верхушкой айсберга ― так называемый «айсберг-эффект», когда на один клинический случай приходится 15-20 инфицированных животных, у которых болезнь протекает в латентной форме. «Скрытость» инфекции, низкие специфичность и чувствительность методов диагностики, сложность выделения и культивирования микобактерий паратуберкулеза, а также отсутствие возможности воспроизведения болезни на лабораторных животных ― вот основные причины, затрудняющие постановку диагноза этого давно известного, но недостаточно изученного хронического заболевания.

Достижения в области молекулярной генетики привели к разработке новых подходов к обнаружению возбудителя в диагностическом материале. На протяжении последних лет широко используют молекулярные технологии для генотипирования и дифференциации возбудителей на уровне ДНК, в частности, ПЦР.

В доступной отечественной литературе сведений о применении ПЦР при диагностике паратуберкулеза КРС мы не обнаружили. Поэтому, учитывая недостаточную изученность некоторых важных вопросов диагностики, длительность, трудоемкость и сравнительно низкую эффективность классических методов прижизненной и лабораторной диагностики, изучение возможности применения метода ПЦР при диагностике паратуберкулеза КРС является вполне своевременным и актуальным.

Цель исследования

Определить возможность применения ПЦР при диагностике паратуберкулеза КРС.

Материалы и методы

Исследования по диагностике паратуберкулеза КРС проводили в соответствии с «Наставлением по диагностике паратуберкулеза (паратуберкулезного энтерита) животных», утвержденного Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 05.01.2001 г., № 13-5-02/0050.

Для ПЦР-исследования проб фекалий от коров использовали тест-системы «ПАРАТУБ» и «АВИУМ».

Базой для исследования послужило хозяйство, где были выявлены животные, подозреваемые в заражении паратуберкулезом. В 2010 году были выявлены коровы с длительной диареей и, как следствием этого, незначительным истощением и потерей молочной продуктивности.

В соответствии с представленными актами диагностических исследований, проведенных местной ветеринарной службой, и экспертизами лабораторных исследований, в декабре 2010 года межрайонной ветеринарной лабораторией при бактериологическом исследовании проб фекалий от пяти первотелок в двух пробах обнаружен возбудитель паратуберкулеза. В целях уточнения диагноза проведен комиссионный диагностический убой двух коров, у которых результаты бактериоскопии указали на паратуберкулез. При патолого-анатомическом исследовании не обнаружено изменений, характерных для паратуберкулеза. От убитых коров выделена культура возбудителя паратуберкулеза.

В марте 2011 года проведен комиссионный осмотр 404 голов КРС. Животных с клиническими признаками паратуберкулеза не обнаружено. В апреле исследовано 408 проб сыворотки крови коров методом РСК. Выявлено пять животных с положительным и одну особь с сомнительным результатом РСК. В апреле 2011 года все шесть животных были исследованы аллергической внутрикожной пробой с использованием ППД-туберкулина для птиц. Реагирующих не выявлено. В тот же период сыворотка крови от этих животных повторно была исследована в РСК. При повторном исследовании было получено только три положительных результата.

По результатам исследований проведен диагностический убой одной коровы с положительными результатами РСК. При патолого-анатомическом исследовании не обнаружено изменений, характерных для паратуберкулеза. При бактериологическом исследовании патматериала от убитой коровы возбудитель паратуберкулеза не выделен. Однако при бактериоскопическом исследовании патматериала обнаружены кислото- спиртоустойчивые палочки, расположенные полисадом, кучками и давшие основание предполагать наличие возбудителя паратуберкулеза.

В мае 2011 года проведен комиссионный клинический осмотр всего поголовья КРС хозяйства. Животных с клиническими признаками паратуберкулеза не обнаружено.

В связи с сомнениями и сложностью установления диагноза на паратуберкулез, дальнейшие исследования проводили комиссионно, совместно с сотрудниками лаборатории микобактериозов ВИЭВ.

В августе 2011 года в комплексе, где выявлялись подозреваемые в заражении паратуберкулезом животные, проведены комиссионный клинический осмотр поголовья и учет аллергических реакций на внутрикожное введение ППД-туберкулина для птиц. Животных с клиническими признаками паратуберкулеза не выявлено. При учете аллергических реакций через 72 часа после введения туберкулина для птиц реагирующих также не выявлено.

От животных этого комплекса были отобраны 32 пробы фекалий для ПЦР-исследования в ВИЭВ на наличие возбудителя паратуберкулеза. При исследовании ДНК МАР и ДНК M. avium не выделено.

Кроме того, при посещении диагностического центра и беседе с сотрудниками установлено, что при бактериологическом исследовании патматериала от убитых (подозреваемых в заражении паратуберкулезом) животных посевы проводили на обычные питательные среды, используемые для диагностики туберкулеза, без добавления фактора роста (экстракта из M. phlei). В связи с тем, что возбудитель паратуберкулеза в первых генерациях растет и размножается на питательных средах только в присутствии фактора роста, для идентификации выделенных культур микобактерий необходимо было эти культуры посеять на питательные среды с фактором роста и без него. К сожалению, это важное условие идентификации культур микобактерий и диагностики паратуберкулеза не было выполнено. Поэтому выделенные культуры нетуберкулезных (атипичных) микобактерий были ошибочно охарактеризованы как M. paratuberculosis.

Следует указать, что в соответствии с «Наставлением по диагностике паратуберкулеза (паратуберкулезного энтерита) животных» от 2001 года, диагноз на паратуберкулез считается установленным при наличии у животного характерных клинических признаков болезни и получения одновременно положительного результата бактериоскопического или гистологического исследования биоматериала от этих животных; при обнаружении характерных патолого-анатомических изменений в кишечнике и мезентериальных лимфатических узлах животных с гистологическим или бактериоскопическим подтверждением болезни, независимо от наличия или отсутствия клинических признаков заболевания.

Анализ всей ранее проведенной диагностической работы, а также комиссионных диагностических исследований показывает отсутствие в стаде животных с характерными клиническими признаками паратуберкулеза, а также характерных патолого-анатомических изменений в кишечнике и мезентериальных лимфатических узлах с гистологическим или бактериоскопическим подтверждением. Кроме того, ранее выделенные кислото-спиртоустойчивые микобактерии и культуры микобактерий не идентифицированы как M. paratuberculosis, а из фекалий подозреваемых в заболевании паратуберкулезом животных ПЦР-исследованием не выделено ДНК МАР и ДНК M. avium.

В связи со сложностью диагностики паратуберкулеза, диагностические исследования необходимо проводить в соответствии с «Наставлением по диагностике паратуберкулеза» в комплексе с современными дополнительными методами исследований. Обнаружение в патматериале или фекалиях кислото-спиртоустойчивых палочек указывает на наличие микобактерий, но не является основанием для установления диагноза на паратуберкулез. При бактериологическом исследовании патматериала на это заболевание необходимо использовать специальные питательные среды с добавлением фактора роста (микобактин). В комплексе диагностических исследований ПЦР-анализ фекалий коров, подозреваемых в заражении паратуберкулезом, представляет собой эффективный дополнительный тест для подтверждения или исключения заражения животных M. paratuberculosis.

Практическое предложение

В комплекс методов диагностики паратуберкулеза КРС необходимо включить ПЦР-анализ фекалий животных, подозреваемых в заражении паратуберкулезом, для выявления ДНК МАР.

Библиография

1. Шуляк Б.Ф. 110 лет со дня открытия возбудителя паратуберкулёза // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные, 2005; 9: 238―239.

Дифференциальный диагноз

Для того, чтобы специалисту поставить правильный диагноз больному животному необходимо исключить кокцидиоз, туберкулез, глистные инвазии и диетические поносы. Характерной особенностью диетических поносов является массовость. Глистные инвазии и кокцидиоз подтверждается в результате копрологического исследования, особенность кокцидиоза - кал содержит много крови, понос кратковременный. При туберкулезе энтерит распространен не часто, наблюдается поражение лимфоузлов и кахексия.

Читайте также: